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Dernière mise à jour : Mai 2018

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UMR DGIMI Diversité, génomes interactions microorganismes-insectes

Comment capturer les nématodes entomopathogènes ?

Les nématodes entomopathogènes présents dans les sols sont piégés en utilisant des insectes proies.

Le cycle biologique des NEPs passe obligatoirement par une phase de développement et de multiplication dans l'insecte. Ils vont donc être trouvés tout naturellement dans les cadavres d'insectes présents dans les sols. Comme il n'est pas très facile de fouiller la terre à la recherche de cadavres d'insectes qui peuvent, par ailleurs, avoir été victimes de multiples autres pathogènes et parasites (virus, bactéries, champignons et autres parasitoïdes), la chasse aux NEPs se fait donc en utilisant des larves d'insectes enfermées dans un contenant percé - une boule à thé par exemple convient parfaitement - enfoui dans le sol. La chasse aux NEPs se pratique au printemps et à l'automne dans des sols plutôt limoneux et sableux. La teigne des ruchers (Galleria mellonella) est bien souvent l'insecte utilisé comme proie car elle est connue pour sa susceptibilité vis-à-vis des NEPs. Cependant, tout autre larve d'insectes peut être utilisée de la même manière.

Dispositif de collecte des NEPs

Dispositif de récolte des NEPs

Tamisage des NEPs

Tamisage des NEPs

Stockage des NEPs

Stockage des NEPs

Une larve d'insecte parasitée par les NEPs meurt en 2-3 jours dans les conditions de laboratoire. Ainsi, les pièges peuvent être laissés en place, enfouis dans le sol entre 5 et 8 jours. Il n'est pas utile de les laisser plus longtemps, les larves d'insectes risqueraient alors de mourir pour de nombreuses autres raisons. Après ce délai permettant l'infestation, les larves mortes sont collectées et observées. Celles qui sont manifestement parasitées par des moisissures peuvent être éliminées. Les autres sont placés sur un dispositif de récolte (A, tissu imbibé d'eau physiologique) permettant de collecter les stades juvéniles qui partent habituellement chasser de nouvelles proies dans les sols lorsqu'ils émergent du cadavre, 2 à 3 semaines après infestation. Les larves de NEPs sont ensuite collectées par tamisage (B). Elles peuvent être stockées à basse température (8°C pour Steinernema et 15°C pour Heterorhabditis) dans de l'eau physiologique pendant plusieurs mois (C).